三、分子印迹过程

前面介绍的识别材料是通过分子印迹或分子修饰工艺制备的。在Neves等人（2017）最近的一篇文章中提出了分子印迹的新方法或新工艺。通过这些方法，我们可以将模板合并到聚合物结构中，以便以后能够识别。图6-4显示了前面描述的识别聚合物网络的主要生产过程。

图6-4　识别聚合物网络的主要生产过程（引自Neves，et al.2017）

选择合适的模板分子、功能单体和交联剂后，将所有组分混合在合适的溶剂（如去离子水、磷酸盐缓冲液）中，形成预聚合复合物（模板功能单体）。然后进行聚合，稳定特定的空腔和结合位点。

最后，通过模板等洗涤步骤，去除未反应单体和交联分子，得到理想的分子印迹聚合物（MIP）。不同的聚合物官能团可以与不同的蛋白质结构域相互作用，因此使用杂多聚体系统（具有多个官能团的功能单体）可以改善印迹特征。此外，这些官能团还可以改变最终MIP的化学和/或机械性能，如图6-5所示。

图6-5　识别聚合物网络分子印迹的步骤（引自Peppas和Clegg.2016）

自然识别是生物领域中一个众所周知的过程，可以在抗体、酶、核酸和细胞中观察到。累积的超分子力可导致高亲和力的识别。Hilt和 Byrne（2004）对这一过程进行了出色的分析。我们在分子印迹技术方面有20年的经验。我们已经在这个领域发表了11项美国专利和100多篇文章。

生物分析物是一个具有良好的生物印迹和识别能力的例子，由聚乙二醇200二甲基丙烯酸酯（PEG200DMA）与丙烯酸共聚（以二甲基亚砜制备），具有67%交联率的识别网络识别荧光标记葡萄糖。图6-6所示的识别网络（左）对葡萄糖的识别强度几乎是对照组的5倍。此外，我们还证明了相同的凝胶材料可以帮助比较结合。在图6-7中，我们展示了聚乙二醇200二甲基丙烯酸酯（PEG200DMA）与丙烯酸（二甲基亚砜制备）共聚合67%交联率的凝胶网络是如何从葡萄糖（A）中识别半乳糖（B和C）的。

图6-6　荧光葡萄糖类似物与聚乙二醇-丙烯酸共聚物67%交联比的识别

A.可识别组[I＝208.84+/-6.48（10 000 像素）]；B.对照组[I＝208.84+/-6.48（10 000 像素）]。