天麻
GASTRODIAE RHIZOMA
本品为兰科植物天麻Gastrodia elata Bl.的干燥块茎。主产于四川、云南、贵州等省,东北及华北各地亦产。立冬后至次年清明前采挖,立即洗净,蒸透,敞开低温干燥。其性平,味甘。具有息风止痉、平肝抑阳等功效[1]。
【主要成分】 主要含有酚苷类及其苷元,其中天麻素(即对羟甲基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷)是天麻中的主要成分。另含赤箭苷、对羟基苯甲醇、对羟基苯甲醛、4-羟苄基甲醚、香草醇等。
【定性分析】
(1)取药材粉末0.5g,加70%甲醇5mL,超声处理30min,滤过,滤液作为供试品溶液。另取天麻对照药材0.5g,同法制成对照药材溶液。再取天麻素对照品,加甲酸制成每1mL含1mg的溶液,作为对照品溶液。吸取上述供试品溶液10μL,对照药材溶液及对照品溶液各5μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以乙酸乙酯-甲醇-水(9:1:0.2)为展开剂,展开,取出晾干,喷以10%磷钼酸乙醇溶液,105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
(2)取对羟基苯甲醇对照品,加乙醇制成每1mL含1mg的溶液,作为对照品溶液。取定性分析(1)项下供试品溶液10μL,对照药材及对照品溶液5μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以石油醚(60~90℃)-乙酸乙酯(1:1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%磷钼酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
【含量测定】 天麻素,对羟基苯甲醇[1]
(1)色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以乙腈-0.05%磷酸溶液(3:97)为流动相,检测波长为220nm。理论板数按天麻素峰计算应不低于5000。
(2)对照品溶液的制备 取天麻素对照品、对羟基苯甲醇对照品适量,精密称定,加乙腈-水(3:97)制成每1mL含天麻素50μg、对羟基苯甲醇25μg的混合溶液,即得。
(3)供试品溶液的制备 取本品粉末(过三号筛)约2g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入稀乙醇50mL,称定重量,超声处理(功率120W,频率40k Hz)30min,放冷,再称定重量,用稀乙醇补足减失的重量,滤过,精密量取续滤液10mL,浓缩至近干无醇味,残渣加乙腈-水(3:97)混合溶液溶解,转移至25mL量瓶中,并用乙腈-水(3:97)混合溶液稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
(4)测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μL,注入液相色谱仪,测定,即得。
本品按干燥品计算,含天麻素(C13H18O7)和对羟基苯甲醇(C7H8O2)的总量不得少于0.25%。
【现代研究】
刘智等[2]以天麻素为内标物,采用一测多评技术(QAMS)测定天麻药材中对羟基苯甲醇、对羟基苯甲醛、巴利森苷的含量,并用外标法验证了该方法的可行性。色谱条件:采用Phenomenex Hydro-RP 80A色谱柱(150mm×4.6mm,4μm);以乙腈-0.1%磷酸为流动相进行梯度洗脱,流速1.0mL/min,检测波长270nm,柱温40℃。
朱培芳等[3]采用苯酚-硫酸法测定云南昭通产天麻中天麻多糖含量。
涂雪莲等[4]采用日立L-8800氨基酸自动分析仪对7种天麻中氨基酸进行测定检测其差异。结果表明,不同产地的天麻中氨基酸的含量存在差异。
刘玉红等[5]采用RP-HPLC法同时测定天麻中游离天麻素、巴利森苷和总天麻素的含量。色谱柱为LUNAC18(2)(150mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-1%冰醋酸(梯度洗脱),体积流量0.8mL/min,柱温35℃,检测波长270nm。
李志峰等从天麻50%乙醇提取物中分离得到9个化合物,其中分离得到未见报道的新化合物天麻呋喃二酮;首次分离得到对羟基苄基二硫醚。
黄小玲等[7]采用HPLC法初步建立了天麻药材的指纹图谱,标定出16个共有峰。方法:采用Ultimate XB-C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-1%冰醋酸水溶液(梯度洗脱),柱温为30℃,流速1.0mL/min,检测波长270nm。
谭碧君等运用优化的HPLC法测定天麻的生化指纹图谱及其天麻素含量,利用指纹图谱对天麻进行科学分类和评价。结果表明天麻的天麻素含量与生化指纹图谱和产地之间有明显的相关性。
【参考文献】
[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典:一部[S].北京:中国医药科技出版社,2015:58.
[2]刘智,王爱民,许祖超等.一测多评技术在天麻药材质量评价中的应用[J].中国药房,2012,23(47):4469-4471.
[3]朱培芳,陈涛,顾雯等.云南昭通产天麻中天麻多糖含量的测定[J].光谱实验室,2013,30(6):2960-2963.
[4]涂雪莲,范巧佳.不同产地天麻氨基酸的含量测定[J].氨基酸和生物资源,2013,35(4):64-67.
[5]刘玉红,易进海,陈燕等.RP-HPLC法同时测定天麻中游离天麻素、巴利森苷和总天麻素[J].中成药,2012,34(1):182-184.
[6]李志峰,王亚威,王琦等.天麻的化学成分研究(Ⅱ)[J].中草药,2014,45(14):1976-1979.
[7]黄小玲,杨春燕,袁慧文.天麻药材高效液相色谱指纹图谱研究[J].中国药业,2011,20(2):17-19.
(李娟/窦金凤)